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發(fā)布時(shí)間:2021-11-26 09:56:26
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不動(dòng)桿菌顯色培養基的應用

  • 分類(lèi):新聞中心
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  • 來(lái)源:
  • 發(fā)布時(shí)間:2022-06-14
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【概要描述】

不動(dòng)桿菌顯色培養基的應用

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詳情

鮑曼不動(dòng)桿菌(Acinetobacter baumannii),屬于革蘭氏陰性菌,是一種嚴格需氧、非乳糖發(fā)酵的條件致病菌,移動(dòng)性不高,但生命力極強,可廣泛地存在于大自然中。

該菌是不動(dòng)桿菌屬細菌中在醫院感染中常見(jiàn)的一種,也是水產(chǎn)養殖業(yè)動(dòng)物的病原菌。它通常會(huì )引起菌血癥,肺炎,腦膜炎,腹膜炎,心內膜炎,以及泌尿道和皮膚感染。鮑曼不動(dòng)桿菌已經(jīng)成為醫院感染的主要來(lái)源,尤其是重癥監護室。

近些年來(lái),鮑曼不動(dòng)桿菌被人們發(fā)現對許多常用的抗生素都耐藥,包括β內酰胺類(lèi)和氨基糖甙類(lèi)。其中,需要機械通氣的免疫力下降患者最具有感染不動(dòng)桿菌的高風(fēng)險。

而鮑曼不動(dòng)桿菌的傳統檢測方法相較困難,一方面由于大量抗生素及化療約物的應用,導致細菌生物學(xué)特性發(fā)生變化,影響細菌細胞壁的合成及細胞膜的通透性,且由于該菌初次分離時(shí)伴有其他雜菌生長(cháng),雖然鑒定所用為單個(gè)菌落,但多種細菌共存于一個(gè)平板,各菌在生長(cháng)代謝過(guò)程中可能會(huì )產(chǎn)生一些物質(zhì),干擾鮑曼不動(dòng)桿菌的正常生長(cháng)。

另一方面傳統鮑曼不動(dòng)桿菌的檢測鑒定操作要求嚴格,存菌液的濃度、均勻度、溫度及細菌的純度等多方面都有其特定的要求。鮑曼桿菌的生化反應較弱,大多生化反應均為陰性,若實(shí)際操作過(guò)程中在某一方面不夠重視,或某一生化反應的差異導致細菌鑒定結果的不同,都可能導致鑒定結果的差異。

因此,能夠精準而快速的檢測多重耐藥的不動(dòng)桿菌尤為重要。不動(dòng)桿菌顯色培養基(貨號:M1938,Hicrome Acinetobacter Agar Base)【需要其中一種添加劑:MDR 選擇性添加劑(貨號:FD271)/利茲不動(dòng)桿菌選擇性添加劑(貨號:FD335)】適用于檢測從環(huán)境和臨床樣本中選擇性分離多重耐藥不動(dòng)桿菌,35-37°C培育24-48小時(shí)即出結果(如下圖,多重耐藥不動(dòng)桿菌菌落顯紫色)。

該顯色培養基中的復合顯色劑針對的是不動(dòng)桿菌的特異性酶,因此特異性高,優(yōu)于傳統的以生化代謝反應為分離基礎的利茲不動(dòng)桿菌瓊脂(Leeds Acinetobacter Agar Base,HiMedia貨號M1839)。

培養基所需的添加劑如FD271為氨芐青霉素鈉鹽和頭孢他啶,可選擇性分離耐藥型不動(dòng)桿菌。該培養基中的特別蛋白胨提供氮源、碳源化合物、氨基酸、維生素和其他必要的生長(cháng)因子。氯化鈉維持滲透壓平衡。選擇因子抑制革蘭氏陽(yáng)性菌。

非耐藥型不動(dòng)桿菌不會(huì )在該培養基上生長(cháng),而耐藥型不動(dòng)桿菌如鮑曼不動(dòng)桿菌ATCC BAA-1605(對頭孢他啶、慶大霉素、替卡西林、哌拉西林、氨曲南、頭孢吡肟、環(huán)丙沙星、亞胺培南和美羅培南有抗藥性,對阿米卡星和妥布霉素敏感)則可旺盛生長(cháng),其回收率大于50%。該不動(dòng)桿菌顯色培養基特別適合用于不動(dòng)桿菌的耐藥研究。

對不動(dòng)桿菌具體菌種的確證性鑒定可使用HiMedia公司生產(chǎn)的不動(dòng)桿菌鑒定試劑盒(貨號:KB014,HiAcinetobacter™ Identification Kit)(下圖),操作方便,節省時(shí)間。

不動(dòng)桿菌鑒定試劑盒包含的鑒定條含24種生化鑒定反應:

A部分:

第1孔:吲哚試驗

第2孔:伏普試驗

第3孔:檸檬酸鹽試驗

第4孔:賴(lài)氨酸試驗

第5孔:鳥(niǎo)氨酸試驗

第6孔:精氨酸試驗

第7孔:硝酸鹽還原試驗

第8孔:丙二酸試驗

第9孔:尿素酶試驗

第10孔:苯丙氨酸脫氨試驗

第11孔:H2S產(chǎn)生試驗

第12孔:ONPG試驗

B部分:

第1孔至第12孔:糖發(fā)酵試驗

每孔接種50l菌液,35 – 37°C孵育,18-24h后即可觀(guān)察結果。生化反應的結果依據每孔顏色與試劑盒中的結果詮釋表對照,以判定陰性陽(yáng)性,再通過(guò)菌種標準表鑒定不動(dòng)桿菌菌種。

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