碳青霉烯類抗生素常用于治療多重耐藥腸桿菌科感染，其耐藥性增加的機制是肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶[KPC, Klebsiella pneumoniae carbapenemase].KPC ß-內(nèi)酰胺酶最常見于肺炎克雷伯菌，但在其他種類的腸桿菌科[克雷伯氏催產(chǎn)桿菌、腸桿菌屬、大腸桿菌屬、沙門氏菌屬、弗氏檸檬酸桿菌屬和沙雷氏菌屬]和銅綠假單胞菌中也有少許報告。

        KPC酶對包括青霉素、頭孢菌素、單胺菌素和大多數(shù)β-內(nèi)酰胺/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑在內(nèi)的所有β-內(nèi)酰胺類藥物具有耐藥性.KPC水解碳青霉烯類藥物[厄他培南、亞胺培南和美羅培南]降低其活性，對臨床患者護理和公共健康構(gòu)成巨大威脅。

        對產(chǎn)KPC的臨床分離株進行實驗室鑒定，對于限制具有這種耐藥機制的菌株的傳播至關(guān)重要。試驗評估了一種新的檢測KPC潛在方法：先用CRE顯色培養(yǎng)基進行篩選，然后用MTS藥敏試紙[MTS,MIC test Strip]MTS厄他培南/厄他培南+硼酸和MTS美羅培南/美羅培南+硼酸進行確認。

        細菌分離株：通過分子診斷方法確定的91株具有已知耐藥機制的細菌分離株[獲得性ampC,MBL,KPC和產(chǎn)ESBL的腸桿菌科].將所有研究的分離物在-20°C冷凍,并在Mueller Hinton Agar平板上連續(xù)培養(yǎng)兩天,以確保培養(yǎng)物的純度。

耐碳青霉烯類抗菌藥物腸桿菌科細菌[CRE]顯色培養(yǎng)基

        利飛馳系列CRE顯色培養(yǎng)基，用來檢測耐碳青霉烯的腸桿菌科細菌。所有平板在36 +/- 1°C需氧條件下孵育，在18-24小時后讀取結(jié)果數(shù)，并根據(jù)說明書進行結(jié)果解釋。

肺炎克雷伯菌KPC陽性

MTS藥敏試紙     

        MTS厄他培南/厄他培南+硼酸是由厄他培南[0.125-8 mg/L]和厄他培南[0.032-2 mg/L]加固定濃度硼酸的雙邊梯度定量試紙。MTS美羅培南/美羅培南+硼酸是由美羅培南[0.125-8mg/L]和美羅培南[0.032-2 mg/L]加上固定濃度的硼酸的雙邊梯度定量試紙。

       所有試紙條均接種在MH瓊脂平板上，孵育24小時后進行結(jié)果解釋。所有菌株均在CRE顯色培養(yǎng)基上，并在MH瓊脂平板上用MTS厄他培南/厄他培南+硼酸和MTS美羅培南/美羅培南+硼酸進行敏感性和特異性檢測。

MTS厄他培南/厄他培南+硼酸和MTS美羅培南/美羅培南+硼酸

        產(chǎn)KPC的肺炎克雷伯菌在CRE上不受抑制地生長，并產(chǎn)生綠色或藍色菌落[100％敏感性]。對于不產(chǎn)KPC的腸桿菌科細菌，生長不良/無生長/非典型菌落顏色很明顯[特異性為77％]。

        用KPC陽性和陰性菌株評估MTS厄他培南/厄他培南+硼酸和MTS美羅培南/美羅培南+硼酸。兩種測試均顯示對MTS厄他培南/厄他培南+硼酸的敏感性分別為100％和89.3％，對MTS美羅培南/美羅培南的特異性分別為95.6％。

        研究表明，CRE顯色培養(yǎng)基作為KPC產(chǎn)生菌的篩選步驟是有效的，MTS厄他培南/厄他培南+硼酸和MTS美羅培南/美羅培南+硼酸作為其后續(xù)驗證步驟；這種結(jié)合可以快速檢測對碳青霉烯類抗生素耐藥的微生物，并立即實施感染控制措施，避免碳青霉烯類抗生素耐藥的蔓延。